多重?zé)晒饷庖呓M化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理,前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉,共價(jià)結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個(gè)一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測結(jié)果。LabEx提供 AKT、MAPK、Apoptosis等經(jīng)典信號通路研究。sgp130
抗體芯片技術(shù)服務(wù)包括:1,樣品蛋白質(zhì)抽提:a.實(shí)驗(yàn)對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。b.實(shí)驗(yàn)對象為細(xì)胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細(xì)胞,PBS清洗細(xì)胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。c.實(shí)驗(yàn)對象為血清,則直接進(jìn)入步驟3。2,蛋白質(zhì)定量:按蛋白質(zhì)定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。3.細(xì)胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育a.細(xì)胞因子抗體芯片封閉后加入50-500ug蛋白質(zhì)(若標(biāo)本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。b.加入標(biāo)記好的抗體室溫孵育1小時(shí)。4,抗體芯片檢測5.提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告:包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法和芯片實(shí)驗(yàn)結(jié)果的各種圖表和數(shù)據(jù)比較。您只需提供保存完好的標(biāo)本(血清、組織或細(xì)胞、細(xì)胞上清或其他非常規(guī)液質(zhì)生物樣本),本公司專業(yè)的技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成實(shí)驗(yàn)操作與數(shù)據(jù)分析。CD40 LigandLabEx抗體芯片主要用于蛋白表達(dá)譜、蛋白質(zhì)磷酸化及蛋白質(zhì)相互作用等檢測。
Luminex液相芯片檢測實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原理:Luminex:應(yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時(shí)檢測高達(dá)500個(gè)蛋白或基因。Luminex技術(shù)的測量結(jié)果在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平。Luminex應(yīng)用的熒光編碼微球帶有針對不同目標(biāo)分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實(shí)驗(yàn)中可以同時(shí)完成多個(gè)目標(biāo)分子的分析。多目標(biāo)分子的同時(shí)測定可以減少生物樣品的消耗量,節(jié)省成本和測定時(shí)間,并且使多種目標(biāo)分子之間相關(guān)性的分析更加準(zhǔn)確。目前,Luminex試劑盒已經(jīng)可以檢測500多種蛋白質(zhì)分子,包括細(xì)胞因子、自身抗體、腫塊物標(biāo)志物等。
免疫組化技術(shù)是用標(biāo)記物標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞的抗原(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、、病原體以及受體等)反應(yīng),結(jié)合形態(tài)學(xué)檢查,對抗原作定性、定量、定位檢測的技術(shù)。目前通常選用免疫酶組化間接染色法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),利用該技術(shù)可進(jìn)行細(xì)胞、亞細(xì)胞水平的檢測。 近幾年,分子生物學(xué)研究異?;钴S,但終還要?dú)w到形態(tài)上來。用免疫組織化學(xué)方法對所研究的大分子進(jìn)行定位,進(jìn)而深入研究其功能。 分類:免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等 特點(diǎn):具有特異性強(qiáng)、靈敏度高及能將形態(tài)研究與功能、代謝研究有機(jī)地結(jié)合在一起 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本:實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。 抗體:免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體LabEx提供MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺服務(wù)!
HALO分析平臺LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺,用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺,助推科研進(jìn)步!技術(shù)介紹LabEx數(shù)字病理圖像分析平臺,為您提供病理圖像分析的全套解決方案,包括可進(jìn)行高通量、全切片式的組織分析的圖像分析的病理圖像分析平臺HALO。憑借其易用性和可擴(kuò)展性,在免疫腫塊物學(xué)、腫塊物學(xué)、移植科學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、眼科、代謝、呼吸和病理學(xué)等領(lǐng)域有著較廣的應(yīng)用。目前HALO數(shù)字病理圖像分析平臺用戶遍布于全球的生物制藥公司、醫(yī)療和研究組織。MSD作為現(xiàn)階段靈敏度較高的檢測技術(shù),常用于常規(guī)生物標(biāo)志物檢測和信號通路研究。MET
液態(tài)流式技術(shù)(Luminex),流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等。sgp130
Q:多因子實(shí)驗(yàn)還用的樣本類型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實(shí)驗(yàn)中血清好檢測,還是血漿好檢測?A:文獻(xiàn)報(bào)道EDTA的血漿適合做多因子實(shí)驗(yàn),具體需研究者根據(jù)自己實(shí)際條件選擇。Q:為什么要做預(yù)實(shí)驗(yàn)?A:試劑說明書中的樣本稀釋比例不精確,需要進(jìn)一步確認(rèn)。預(yù)實(shí)驗(yàn)主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測范圍內(nèi),從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過高,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。3.讓研究者在正式實(shí)驗(yàn)中有選擇的依據(jù)。Q:血清血聚溶血,對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴(yán)重程度看區(qū)別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻(xiàn)上看沒有明確的數(shù)據(jù)支持。sgp130
上海樂備實(shí)生物技術(shù)有限公司成立于2018-04-28,是一家專注于標(biāo)志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù)的高新技術(shù)企業(yè),公司位于古丹路15號18號樓4樓。公司經(jīng)常與行業(yè)內(nèi)技術(shù)專家交流學(xué)習(xí),研發(fā)出更好的產(chǎn)品給用戶使用。公司主要經(jīng)營標(biāo)志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù)等產(chǎn)品,我們依托高素質(zhì)的技術(shù)人員和銷售隊(duì)伍,本著誠信經(jīng)營、理解客戶需求為經(jīng)營原則,公司通過良好的信譽(yù)和周到的售前、售后服務(wù),贏得用戶的信賴和支持。公司與行業(yè)上下游之間建立了長久親密的合作關(guān)系,確保標(biāo)志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù)在技術(shù)上與行業(yè)內(nèi)保持同步。產(chǎn)品質(zhì)量按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研發(fā)生產(chǎn),絕不因價(jià)格而放棄質(zhì)量和聲譽(yù)。LabEx秉承著誠信服務(wù)、產(chǎn)品求新的經(jīng)營原則,對于員工素質(zhì)有嚴(yán)格的把控和要求,為標(biāo)志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù)行業(yè)用戶提供完善的售前和售后服務(wù)。